什么是超低吸附細(xì)胞培養(yǎng)板?

　　這是一種經(jīng)過(guò)特殊處理的細(xì)胞培養(yǎng)耗材，其核心設(shè)計(jì)目的是最大限度地抑制細(xì)胞的貼壁附著，從而便于進(jìn)行懸浮細(xì)胞培養(yǎng)或形成三維細(xì)胞聚集體。

　　一、什么是超低吸附培養(yǎng)板?

　　普通細(xì)胞培養(yǎng)板(如TC處理)的表面是親水性的，并帶有電荷，旨在促進(jìn)細(xì)胞貼壁和生長(zhǎng)。而超低吸附(Ultra-Low Attachment, ULA)培養(yǎng)板則恰恰相反：

　　表面處理：其表面經(jīng)過(guò)一種惰性的水凝膠聚合物(通常是共價(jià)鍵結(jié)合的親水聚合物) 處理。這種材料是電中性的、高度親水，但生物惰性。

　　工作原理：這種惰性表面無(wú)法提供細(xì)胞貼附所需的化學(xué)鍵或電荷相互作用。因此，細(xì)胞無(wú)法牢固地貼附在板底，而是在培養(yǎng)基中保持懸浮狀態(tài)，或者與其他細(xì)胞相互聚集。

　　二、主要特點(diǎn)和優(yōu)勢(shì)

　　抑制細(xì)胞貼壁：解決了需要細(xì)胞保持懸浮狀態(tài)的研究需求。

　　促進(jìn)細(xì)胞聚集：由于細(xì)胞無(wú)法貼壁，它們會(huì)彼此尋找并聚集，自發(fā)形成3D細(xì)胞球狀體(Spheroid) 或類(lèi)器官(Organoid)。

　　減少細(xì)胞分化：對(duì)于干細(xì)胞研究，貼壁常常會(huì)引發(fā)不必要的自發(fā)分化。使用ULA板可以維持干細(xì)胞的未分化狀態(tài)和多能性。

　　減少蛋白吸附：其表面同樣能有效減少培養(yǎng)介質(zhì)中蛋白質(zhì)的吸附，確保培養(yǎng)基成分的穩(wěn)定性。

　　模擬體內(nèi)環(huán)境：3D細(xì)胞球體能夠更好地模擬體內(nèi)細(xì)胞的真實(shí)微環(huán)境(包括細(xì)胞-細(xì)胞相互作用、營(yíng)養(yǎng)和氧氣梯度等)，比傳統(tǒng)的2D貼壁培養(yǎng)能提供更生理相關(guān)的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。

　　三、主要應(yīng)用領(lǐng)域

　　ULA培養(yǎng)板在現(xiàn)代生命科學(xué)研究中應(yīng)用極其廣泛，尤其是在以下領(lǐng)域：

　　癌癥研究：

　　腫瘤球體形成：用于研究腫瘤干細(xì)胞的自我更新、增殖、耐藥性以及侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)制。

　　抗癌藥物篩選：3D腫瘤球體對(duì)藥物的反應(yīng)更接近體內(nèi)實(shí)體瘤，因此篩選結(jié)果更具預(yù)測(cè)性。

　　干細(xì)胞研究：

　　胚胎干細(xì)胞和誘導(dǎo)多能干細(xì)胞的懸浮培養(yǎng)：用于大規(guī)模擴(kuò)增或維持其未分化狀態(tài)。

　　擬胚體形成：這是干細(xì)胞定向分化為三胚層(內(nèi)胚層、中胚層、外胚層)的關(guān)鍵第一步。

　　類(lèi)器官培養(yǎng)：

　　在特定生長(zhǎng)因子的誘導(dǎo)下，單個(gè)干細(xì)胞或組織 progenitor 細(xì)胞可以在ULA板中自組織形成具有空腔結(jié)構(gòu)、多種細(xì)胞類(lèi)型的微小器官(如腸類(lèi)器官、腦類(lèi)器官、肝類(lèi)器官等)。

　　免疫細(xì)胞研究：

　　用于擴(kuò)增和培養(yǎng)懸浮生長(zhǎng)的免疫細(xì)胞，如T細(xì)胞、NK細(xì)胞等，用于CAR-T、免疫治療等研究。

　　毒理學(xué)研究：

　　使用肝細(xì)胞球體等模型來(lái)評(píng)估化合物的肝毒性，比2D模型更準(zhǔn)確。

　　四、與其它培養(yǎng)板的區(qū)別

　　特性          超低吸附(ULA)板                           普通貼壁(TC)板                無(wú)處理(未涂層)板

　　表面性質(zhì)    共價(jià)鍵合水凝膠，親水、電中性、生物惰性    經(jīng)處理帶負(fù)電荷，親水         通常為疏水的聚苯乙烯表面

　　細(xì)胞行為    細(xì)胞不貼壁，形成懸浮聚集體(球體)          細(xì)胞緊密貼壁，呈單層生長(zhǎng)     細(xì)胞貼附能力很弱，但可能不規(guī)則貼附，難以形成均勻單層

　　主要用途    3D球體、類(lèi)器官、干細(xì)胞、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)      常規(guī)貼壁細(xì)胞系的培養(yǎng)         有時(shí)用于短期培養(yǎng)或某些需要弱貼附的細(xì)胞

　　蛋白吸附    極低                                      中等                         高

　　五、使用注意事項(xiàng)

　　輕柔操作：由于細(xì)胞處于懸浮或聚集狀態(tài)，換液、加藥等操作需要格外輕柔，避免吸走細(xì)胞團(tuán)。

　　接種密度：形成球體的細(xì)胞接種密度至關(guān)重要，它直接決定了最終形成球體的大小和均一性。需要根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康倪M(jìn)行優(yōu)化。

　　觀察與檢測(cè)：球體的觀察最好使用倒置顯微鏡。進(jìn)行MTT/CCK-8等檢測(cè)時(shí)，需要選擇適用于懸浮細(xì)胞的方法。

　　回收細(xì)胞：回收形成的球體通常需要使用移液器 使用特定的酶進(jìn)行輕微消化分散。

　　注：以上資料僅供參考，不作為實(shí)驗(yàn)依據(jù)，具體產(chǎn)品說(shuō)明請(qǐng)咨詢(xún)品牌供應(yīng)商或技術(shù)老師。

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